摘要
2 828份粪便标本中检出副溶血弧菌100株，检出率为3.54%，每年7~9月是检出高峰月份。不同年份副溶血弧菌检出率差异具有统计学意义（
副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus，VP）是一种革兰氏阴性菌，在全世界各沿海地区广泛分布，通常与鱼类和渔业产品有
2015—2021年通州区2家哨点医院报告的食源性疾病主动监测病例，符合研究对象要求的门诊病例采集其新鲜粪便样本。经统计，2015—2021年期间共采集2 828份有效标本，经检测鉴定共分离到100株副溶血弧菌。
ABI 7500荧光定量PCR仪（美国ThermoFisher公司），VITEK 2 compact全自动微生物鉴定系统及革兰阴性细菌鉴定卡（法国生物梅里埃股份有限公司），Bio-Rad CHEF MAPPER/DRⅢ电泳仪、凝胶成像仪（美国Bio-Rad公司）。
3%NaCl碱性蛋白胨水（北京陆桥），弧菌显色培养基（法国科玛嘉），副溶血弧菌鉴定血清（日本生研公司），XbaⅠ和SfiⅠ内切酶（TaKaRa），SeaKem Gold Agaros（Lonza），蛋白酶K（Merck），副溶血弧菌（tlh/tdh/trh）三重实时荧光PCR检测试剂盒（北京卓诚惠生），肠杆菌药敏测试A3/A4板（上海星佰）。所有试剂均在有效期内使用。
VP致病性主要由溶血素引起，包括不耐热溶血素（Thermolabile hemolysin，TLH）、耐热直接溶血素（Thermostable direct hemolyticus，TDH）和耐热直接溶血素相关溶血素（Tdh-related hemolysis，TRH），分别由tlh、tdh和trh基因编
药敏试验采用MIC法进行，选择26种抗生素，根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）发布的药物敏感试验标准（2017版）进行耐药判定，分为敏感（S）、中介（I）和耐药（R）。质控菌株为大肠埃希氏菌（ATCC 25922）。
2015—2021年4~10月皆有副溶血弧菌检出，全年呈先升后降的流行态势（见
图1 副溶血弧菌的月检出率分布
Figure 1 Monthly detection rate distribution of V. parahaemolyticus
100株VP以td
本试验菌株有7种O抗原和9种K抗原，共有16种血清型组合，O3∶K6（66/100）为优势血清型，其次是O4∶K8（9/100），2021年新出现3株O10∶K4血清型菌株。K抗原不能分型的菌株有6株（
图2 100株副溶血弧菌的血清分型
Figure 2 Serological typing of 100 V. parahaemolyticus strains
100株VP菌株中TZ2016VP013和TZ2019VP168在电泳过程中降解，其他98株获得PFGE带型。聚类结果显示98株VP菌株有39个PFGE带型，不同带型分别命名为V1~V39型，V22和V25为优势带型，V22型别菌株包括2015、2016、2018、2020及2021年5年的菌株，V25主要是2015—2019年的菌株，说明这两个带型的菌株是近年来的优势带型，V22在这7年间一直作为优势带型呈低流行态势。菌株带型较多，所以
图3 副溶血弧菌两个主要流行型别的PFGE聚类图
Figure 3 PFGE clustering diagram of the two main epidemic types of V. parahaemolyticus
菌株对头孢唑林耐药率最高，为32.00%（32/100），中介32株；氨苄西林为14.00%（14/100），中介1株；多黏菌素E为13.00%（13/100）；对四环素类、氯霉素类、氨基糖苷类、碳青霉烯类四类药物全部100%敏感（
| 抗生素类别 | 名称 | 敏感S | 中介I | 耐药R | 耐药率/% |
|---|---|---|---|---|---|
| β-内酰胺类 | 氨苄西林AMP | 85 | 1 | 14 | 14.00 |
| 氨苄西林-舒巴坦AMS | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 阿莫西林-克拉维酸AMC | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 氨曲南AZM | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 四环素类 | 四环素TET | 100 | 0 | 0 | 0.00 |
| 米诺环素MIN | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 多西环素DOX | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 氯霉素类 | 氯霉素CHL | 100 | 0 | 0 | 0.00 |
| 磺胺类 | 复方新诺明SXT | 100 | 0 | 0 | 0.00 |
| 磺胺异𫫇唑SIZ | 94 | 0 | 6 | 6.00 | |
| 头孢类 | 头孢唑林CFZ | 36 | 32 | 32 | 32.00 |
| 头孢噻肟CTX | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 头孢他啶CAZ | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 头孢西丁CFX | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 头孢吡肟FEP | 99 | 1 | 0 | 0.00 | |
| 氨基糖苷类 | 庆大霉素GEN | 100 | 0 | 0 | 0.00 |
| 阿米卡星AMI | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 卡那霉素KAN | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 链霉素STR | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 碳青霉烯类 | 亚胺培南IMI | 100 | 0 | 0 | 0.00 |
| 美罗培南MEM | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 喹诺酮类 | 左氧氟沙星LEV | 99 | 0 | 1 | 1.06 |
| 萘啶酸NAL | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 环丙沙星CIP | 100 | 0 | 0 | 0.00 | |
| 多肽类 | 多黏菌素ECT | 87 | 0 | 13 | 13.00 |
| 多黏菌素BPB | 90 | 8 | 2 | 2.00 |
2015—2021年间，通州区VP检出高峰为每年7~9月，年检出率之间的差异有统计学意义，2016年检出率高于其他年份，可能是由于2016年扩大了监测范围；而2020年由于新冠疫情及北京新发地疫情影响，人们外出用餐减少，食用水产品减少，医院门诊量因疫情原因也有所下降，所以2020年整体检出率较低。一般认为，TDH和TRH与VP致病相
PFGE技术分型能力强、重复性好、分辨率高、结果稳定，在确定传染源和流行菌株方面有很大作用，因此PFGE被誉为分子流行病学的“金标准
20世纪70年代末，PAZHANI
综上所述，通州区2015—2021年食源性疾病监测病例中检出的副溶血弧菌主要是O3∶K6型td
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