摘要:目的 对三株双歧杆菌用不同方法进行鉴定,并结合药物敏感性测试结果和全基因组测序(WGS)数据,对菌株获得性耐药原件及其可转移性进行分析。方法 分别采用生化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及WGS方法对三个益生菌产品中分离的3株双歧杆菌进行鉴定,测试菌株对氨苄西林等8种抗生素的敏感性,结合WGS数据,使用在线数据库分析菌种携带的获得性耐药原件,并对其可转移性进行分析。结果 对三株双歧杆菌,生化方法可给出较为可靠的属水平鉴定结果;MALDI-TOF MS方法可给出可靠的种水平鉴定结果;基于WGS结果计算ANI值和DDH值,可给出可靠的种和亚种水平鉴定结果,结合wgSNP及wgMLST分析,三株菌鉴定结果均为动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)。三株菌对四环素和庆大霉素均呈现敏感性下降表型,其中庆大霉素敏感性下降与厌氧菌种转运系统缺乏有关,为固有表型;三株菌染色体上均携带tet(W),且其下游均存在IS5序列,说明该耐药基因可能为可转移原件,经与GenBank中58个来自不同种属细菌的tet(W)对比发现,动物双歧乳亚种中的tet(W)序列具有一定的保守性。结论 双歧杆菌的鉴定与安全评价应结合生化、MALDI-TOF MS、抗生素敏感性和WGS等技术综合开展,尤其WGS技术不仅可以对双歧杆菌进行亚种水平的精准鉴定,还可以针对耐药原件及可转移性进行深入分析,为相关菌种产品的研发和监管,为益生菌类保健食品、食品行业的健康发展提供有力的技术支撑。