3种不同方法提取芒果致敏原组分分析
DOI:
作者:
作者单位:

(1.天津医科大学医学检验学院,天津 300203; 2.天津医科大学总医院检验科,天津 300052; 3.天津市儿童医院,天津 300204)收稿日期:┣┣(中)收稿日期┫┫2014-06-25 基金项目:┣┣(中)基金项目┫┫国家自然基金项目(81371882)作者简介:┣┣(中)作者简介┫┫侯丽英 女 硕士生 研究方向为食物过致敏原鉴别与应用研究 E-mail:wfhly19901108@16;3.com通讯作者:┣┣(中)通信作者┫┫李会强 男 教授 研究方向为标记免疫分析方法学研究及致敏性疾病的实验室诊断 E-mail:lihuiqiang1965@16;3.com

作者简介:

侯丽英 女 硕士生 研究方向为食物过致敏原鉴别与应用研究 E-mail:wfhly19901108@163.com通讯作者:┣┣(中)通信作者┫┫李会强 男 教授 研究方向为标记免疫分析方法学研究及致敏性疾病的实验室诊断 E-mail:lihuiqiang1965@163.com

通讯作者:

中图分类号:

基金项目:

国家自然基金项目(81371882)


Mango allergen components analysis by three different extracting methods
Author:
Affiliation:

(College of Medical Laboratory,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China)

Fund Project:

  • 摘要
  • |
  • 图/表
  • |
  • 访问统计
  • |
  • 参考文献
  • |
  • 相似文献
  • |
  • 引证文献
  • |
  • 资源附件
  • |
  • 文章评论
    摘要:

    评价3种芒果致敏原提取方法,分析与血清特异性IgE结合的芒果蛋白成分,为临床检测sIgE提供最佳抗原制备方法。方法 分别用三氯乙酸沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、裂解液提取法粗提芒果蛋白,并通过SDS-PAGE和二维电泳技术分析不同提取方法提取的芒果蛋白组分,用免疫印迹和二维免疫印迹的方法鉴定粗提液中与患者特异性IgE结合的蛋白成分。结果 3种方法提取的蛋白组分不同,单例病人血清与3种不同方法提取的蛋白结合的强度和所识别的蛋白组分存在一定差异,三氯乙酸沉淀法和三氯乙酸/丙酮法提取的蛋白反应条带主要是30、40、44、47和90 kD,而裂解液提取的蛋白反应条带主要是23、32、40、46、73、90 kD。结论 3种提取方法各有特点,三氯乙酸沉淀法提取的芒果蛋白粗提液致敏原组分较完整,重复性好,操作简便,能够满足检测芒果sIgE所需已知抗原的要求。

    Abstract:

    To evaluate three extracting methods for mango proteins and analyze the protein components which could bind with serum specific IgE (sIgE) of allergy patients. To provide an optimal antigen extraction protocol for clinical detection of allergen specific IgE. MethodsProteins were extracted from mango using trichloroacetic acid precipitation method, trichloroacetic acid/acetone precipitation method and lysate extraction method, respectively. The total protein components were analyzed by SDS-PAGE and two-dimensional electrophoresis. Immunoblot technique and two-dimensional immunoblot technique were used to identify protein components which could combine with specific IgE. ResultsProtein components extracted by three methods were different. The single patient serum showed different affinity and binding sites in the immunoblot assay. Protein components from trichloroacetic acid precipitation method and trichloroacetic acid/acetone precipitation method reacted with patient serum mainly at 30,0, 44,7 and 90 kD, while that from lysate extraction method reacted with patient serum at mainly 23,2, 40,6, 73 and 90 kD.ConclusionThree kinds of extraction methods had different characteristics, and trichloroacetic acid precipitation method was more complete, reproducible, easy to operate and could meet the requirements of mango sIgE detection.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

侯丽英,张盈莹,朱黎娜,谷冬梅,林书祥,李会强.3种不同方法提取芒果致敏原组分分析[J].中国食品卫生杂志,2014,26(5):417-421.

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
  • HTML阅读次数:
  • 引用次数:
历史
  • 收稿日期:2014-06-25
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期: 2014-10-16
  • 出版日期:
文章二维码
《中国食品卫生杂志》邮寄地址与联系方式变更通知
关闭