椰毒假单胞菌酵米面亚种脉冲场凝胶电泳分型的研究
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郭云昌 男 副研究员 研究方向为食品卫生 E-mail:yunchangguo2006@yahoo.com.cn

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国家自然科学基金杰出青年科学基金


Molecular Typing of Pseudomonas cocovenenans subsp. farinofermentans with Pulsed-Field Gel Electrophoreses
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    目的 建立椰毒假单胞菌酵米面亚种的脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoreses,PFGE)分型方法,并对29株分离株进行PFGE分型研究。方法 分别选择5种限制性内切酶(XbaⅠ、SpeⅠ、NotⅠ、SmaⅠ、AscⅠ)酶切椰毒假单胞菌酵米面亚种染色体DNA以进行PFGE分析,并利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果 NotⅠ、SmaⅠ和AscⅠ的酶切片段过小,而XbaⅠ酶切片段的大小适中但数量过多,不能获得清晰可辨的图谱,均不适于椰毒假单胞菌酵米面亚种的PFGE分型。SpeⅠ酶切的PFGE条带数量和大小适中、指纹图谱清晰可辨,对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率。结论 本研究建立的PFGE分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源。

    Abstract:

    Objective To establish a method for molecular typing Pseudomonas cocovenenans subsp. farinofermentans with pulsed-field gel electrophoreses (PFGE), and to analyze the type of 29 isolates with PFGE method. Method The isolates were digested with 5 kinds of restriction endonucleases XbaⅠ, SpeⅠ, NotⅠ, SmaⅠ and AscⅠ, and the PFGE patterns were analyzed by BioNumerics software. Results The bands on PFGE for the fragments digested by restriction endonucleases NotⅠ, SmaⅠ or AscⅠwere too small, and that digested by XbaⅠ were too many to identify clearly. The restriction endonucleases NotⅠ, SmaⅠ, Asc and XbaⅠwere not suitable for typing the pathogen on PFGE. The number of bands on PFGE for the fragments digested by SpeⅠ was moderate and the pattern of molecular weight was clear and well discriminated. Conclusion This method can be used for molecular typing and tracing Pseudomonas cocovenenans subsp. farinofermentans.

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引用本文

郭云昌,王岗,杜春明,付萍,裴晓燕.椰毒假单胞菌酵米面亚种脉冲场凝胶电泳分型的研究[J].中国食品卫生杂志,2010,22(3):236-238.

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  • 收稿日期:2010-03-08
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