目的探讨建立柱前衍生HPLC法测定胱氨酸和半胱氨酸总含量的方法：方法以二硫代二丙酸（DTDPA）及异硫氰酸苯酯（PITC）为柱前衍生剂，采用反相高效液相色谱法测定酱油中胱氨酸和半胱氨酸总含量。通过对反应温度、反应时间、衍生溶液体积及浓度等影响两步衍生反应效率的因素的研究，获得了优化的实验参数。结果在酱油基质中进行方法认证，线性范围为0．02～1．00mg／ml（R^2=0．9999）。日内和日间精密度RSD〈8％；日内和日间准确度（回收率）分别在100．1％～101．3％和96．4％～103．4％之间，结论本方法适用于酱油中的（半）胱氨酸检测，为鉴别“毛发水酱油”提供了有效的监测手段。