串珠镰刀菌分离菌株PCR筛选鉴定方法的研究
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TS207.4

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国家自然科学基金项目 (3 9870 675 )~~


PCR technique for rapid screening of Fusarium verticillioides
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    摘要:

    为监测粮食中的串珠镰刀菌污染,根据rDNA18S、5.8S、28S及其间区ITS和ITS2序列,设计了1对镰刀菌属特异性引物Fu3/Fu4及2对串珠镰刀菌种特异性引物Fu5/Fu4(Ⅰ型ITS2特异性)和Fu3/Fu2(Ⅱ型ITS2特异性),建立了串珠镰刀菌PCR及复合PCR检测方法。Fu3/Fu4、Fu3/Fu2和FuS/Fu4分剐扩增516bp、375bp和188bp的DNA片段。Fu3/Fu4 PCR的检出灵敏度为10pg,FuS/Fu4为100pg,复合PCR(Fu3、Fu5和Fu4)的检出限为100pg,分别相当于每次反应检出10^3、10^4和10^4个孢子。复合PCR可以同时鉴别镰刀菌属和串珠镰刀菌种。检测了32株从山东、浙江、安徽和河南4省区分离的串珠镰刀菌及交孢镰刀菌,26株为Ⅰ型ITS2特异性,4株为Ⅱ型ITS2特异性,两株待定。该方法可用于大量快速筛选串珠镰刀菌,有利于进一步开展串珠镰刀茵在我国的生态分布、生物地域学及系统发育学等方面的研究。该方法快速、敏感、特异,适宜粮食中串珠镰刀菌污染的监测。

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引用本文

王晓英 刘秀梅.串珠镰刀菌分离菌株PCR筛选鉴定方法的研究[J].中国食品卫生杂志,2005,(2).

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